《食品分析》
课程编号：1241512007
实 验 指 导 书
主撰人 张久春 谭津
审核人 姜子涛
天津商业大学生物技术与食品科学学院
二〇一二年九月
前 言
1. 实验总体目标
食品分析实验课是学生必修的一门实践性很强的学科。食品分析实验课占整个食品分析课时的50%。通过实验教学，使学生熟练掌握食品分析的基本技能和操作，养成严谨实事求是的科学态度；使学生直接获得大量的食品分析检测以及食品科学研究方面的认识，经思维、归纳、总结、从感性认识上升到理性认识。通过实验教学，使学生加深对食品分析基本理论的理解，熟练掌握食品分析的实验方法和基本操作技能。使学生养成独立思考，独立准备和进行实验的能力，养成细致的观察和记录实验现象的良好习惯，获得正确归纳综合处理数据和分析实验结果的能力，为毕业论文和将来从事食品生产、食品检测、品质控制、科研工作奠定良好的基础。
2. 适用专业、年级、课程及课程编号
适用专业：食品科学与工程、商品学、食品质量与安全专业四年级学生。课程：食品分析。课程编号：0741512003。
3. 先修课程
无机与分析化学、有机化学、物理化学、仪器分析及生物化学等课程。
4. 实验课时分配
实验项目
实验要求
实验类型
每组人数
实验
学时
实验一 测定柑橘总酸度
必做
验证型
2
实验二 测定鲜土豆中淀粉含量
3
实验三 测定面粉中蛋白质含量
实验四 测定火腿中亚硝酸盐含量
4
实验五 测定罐头食品中锡含量
综合型
实验六 测定奶粉中脂肪的含量
选作
6
⒌ 实验环境
化学分析实验室、分光光度仪器室各一间。主要仪器设备：电子天平、电炉、凯氏定氮仪、分光光度计等。
⒍ 实验总体要求
使学生掌握食品分析的基本操作，加深对食品分析基本理论的理解。培养锻炼学生独立思考与独立实验的能力以及正确处理数据和分析实验结果的能力，使学生养成细致的观察和记录实验现象的良好习惯。
⒎ 本实验的重点、难点及教学方法建议
在实验教学中要贯彻以实验和理论讲授相结合的原则。重点介绍主要的标准方法所依据的基本原理、样品的采取制备方法以及不同标准方法的应用范围和分析方面的联系。使学生不仅掌握如何进行食品分析实验操作，而且了解为什么要如此操作，利用实验操作加深对食品分析课程理论知识的理解与消化，使理论讲授与实验教学相辅相成。
目 录
实验一
测定柑橘总酸度
实验二
测定鲜土豆中淀粉含量
7
实验三
测定面粉中蛋白质含量
11
实验四
测定火腿中亚硝酸盐含量
15
实验五
测定罐头食品中锡含量
18
实验六
测定奶粉中脂肪的含量
21
实验一：测定柑橘总酸度
一、实验目的
1．通过本实验的学习，使学生了解测定食品中酸度的意义。
2．通过本实验的学习，使学生掌握测定酸度方法。
二、实验内容
1．样品制备。
2．食品中弱酸的滴定。
三、实验要求
采用集中授课形式组织教学。
四、实验准备
1．样品制备及操作。
2．碱式滴定管的使用方法。
五、实验原理、方法和手段
1．实验原理
食品中的弱酸遇碱溶液滴定时，被中和生成盐类，用酚酞作指示剂，在pH=8.2时即为终点，无色的酚酞与碱作用生成酚酞盐，同时失去1分子水，引起醌型排列而呈红色。
2．实验方法和手段
柑橘样品的制备，碱式滴定管的使用。
六、实验条件
1．主要仪器
A．电子天平（1/10000）；电炉（1000w）
B．碱式滴定管25 ml 1支
C．锥形瓶250 ml 2只
D．容量瓶250 ml; 移液管50 ml
2．试剂
A. 0.1mol/L NaOH标准溶液：称取氢氧化钠（AR）120g于250 ml烧杯中，加蒸馏水100 ml，使其溶解，冷却后置于聚乙烯塑料瓶中密封，放置数日澄清后，取上清液5.6 ml，加新煮沸过并冷却的蒸馏水至1000 ml，摇匀。
标定：精确称取约0.3～0.4g（精确至0.0001g）在105～110℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾，加50 ml新煮沸过并冷却的蒸馏水，使其溶解，加二滴酚酞指示剂，用配置的NaOH溶液滴定至溶液成为红色30秒不褪色。同时作空白试验。
计算：
式中: C-----氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，mol/L;
m-----基准邻苯二甲酸氢钾的质量，g；
V1----标定溶液时所消耗氢氧化钠溶液的体积，ml;
V2----空白实验中所消耗氢氧化钠溶液的体积，ml;
204.2-----邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，g/mol.
B. 1%酚酞乙醇溶液：称取酚酞1g溶解于100 ml 95%乙醇中。
3. 测定食品
柑桔
七、实验步骤
1．样品的制备
用小烧杯称取经捣碎均匀的样品2份20～25 g（精确至0.0001g）。用约100 ml水转入250 ml容量瓶中，在75～80℃水浴上加热30分钟，冷却，加水至刻度再摇匀。
2．样品的测定
用滤纸或棉花过滤，弃初滤液约20 ml，吸取滤液50.0 ml，加水50 ml，加酚酞指示剂3滴，用标准NaOH溶液滴定至微红色30秒不褪色，即为终点。记录NaOH溶液ml数。
3．测定结果的计算
式中： C-----标准NaOH溶液的浓度，mol/L;
V-----滴定时消耗标准NaOH溶液体积，ml;
m----样品质量或体积，g或ml;
V0----样品稀释液总体积，ml;
V1----滴定时吸取样液体积，ml;
K-----换算为主要酸的系数，即1毫摩尔氢氧化钠相当于主要酸的克数，苹果酸0.067，柠檬酸0.064，醋酸0.060，酒石酸0.075，乳酸0.090。
八、思考题
九、实验报告
1．预习报告
2．实验记录
基准邻苯二甲酸氢钾的质量m=
标定溶液时所消耗氢氧化钠溶液的体积V1=
空白实验中所消耗氢氧化钠溶液的体积V2=
样品质量m=
滴定时消耗标准NaOH溶液体积V=
3．实验报告
独立完成实验报告并按时提交正式实验报告，用学校统一要求实验报告纸书写。
十、注意事项及其它说明
1．实验前要清点仪器，如果发现缺少应按规定手续项试验准备室领取，实验仪器若有损坏亦应按规定换取新仪器。
2．实验时应保持安静，认真操作，仔细观察实验现象，如实记录试验结果，积极思考问题。
3．实验时应按正确的操作法进行，注意安全
4．实验过程中应保持地面及桌面的整洁。废纸、废液、金属屑等应投入废纸篓或废液桶中，严禁投入或倒入水槽内，防止水槽或下水道堵塞和腐蚀。
5．实验时要爱护公物，小心使用仪器或设备，注意节约用水、电、药品。使用仪器时应严格按操作规程进行，如果发现、仪器有故障应立即停止使用，及时报告指导教师。
6．实验完毕应将玻璃仪器洗涤干净，放回原处，整理好桌面，打扫干净水槽和地面。
7．实验结束后必须关闭电源、水龙头并关好门窗。
实验二：测定鲜土豆中淀粉含量
1．通过本实验的学习，使学生掌握淀粉在酸性条件下水解的方法。
2．通过本实验的学习，使学生掌握碱性酒石酸酮试剂与还原糖反应原理。
2．淀粉在酸性条件下的水解。
3．还原糖的滴定。
2．淀粉水解方法。
样品经过除去脂溶性成分及可溶性糖类后，用酸水淀粉为还原糖，在沸腾条件下，还原糖与酒石酸铜试剂反应，生成的红色氧化亚铜沉淀又与亚铁氰化钾作用生成无色络合物，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基兰还原，溶液由蓝色变为无色，根据样品液消耗体积计算淀粉含量。
土豆样品的制备，淀粉酸性水解的操作。
B．碱式滴定管25 ml 2支
C．锥形瓶500 ml 2只
D．容量瓶250 ml; 移液管5 ml;锥型瓶250 ml; 500 ml
E．回流装置
A．无水乙醚
B．85%乙醇溶液
C．6 mol/L盐酸溶液
D．40%氢氧化钠溶液
E．0.2%甲基红—乙醇溶液
F．20%中性醋酸铅溶液
G．10%硫酸钠溶液
H．碱性酒石酸酮甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基兰，溶于水中并用容量瓶定容至1000 ml。
I．碱性酒石酸酮乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 ml，储存于橡皮塞玻璃瓶中。
J．乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌（Zn(CH3COO)2·3H2O）加3 ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100 ml。
K．0.1%葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过98~100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后移入1000 ml容量瓶中，加入5 ml盐酸，用水定容至1000 ml。
鲜土豆
将鲜土豆洗净，去皮切丝，烘干，粉碎过40目筛，将土豆份保存于密封广口瓶中备用。
精密称取土豆粉0.2~0.4 g（精确至0.0001g），置于放有滤纸的漏斗中，以15 ml乙醚分三次洗去土豆粉中的脂肪，用30 ml 85%乙醇溶液分三次洗涤残渣，以除去可溶性糖类物质，滤干乙醇溶液。量取约100 ml水洗涤漏斗中残渣转移入500 ml带磨口的锥形瓶中，加15 ml 6 mol/L的盐酸溶液，接好冷凝管，置电炉上回流1小时（根据样品不同，时间可调整）回流完毕。冷却，加2滴甲基红指示剂，先用10%氢氧化钠溶液调成黄色，再用6 mol/L盐酸调到刚好变为红色，再用10%氢氧化钠调到红色刚好褪去。若水解液颜色较深利用pH试纸测试，水解液pH为7。（然后加入20 ml 20%醋酸铅，摇匀后放置10分钟，以沉淀蛋白质、果胶等杂质。再加入20 ml 10%硫酸钠溶液，以除去多余的铅。）摇匀后用水转移入250 ml容量瓶中，加水定容，过滤，弃去初滤液10 ml左右，收集滤液供测定使用。
2．标定碱性酒石酸铜试剂
A.预测
加碱性酒石酸铜甲液、乙液各5.0 ml于锥形瓶中，由滴定管预加标准葡萄糖溶液9 ml，放置电炉上加热，使其在两分钟沸腾并维持30秒，然后在溶液沸腾状态下由滴定管继续滴加标准葡萄糖溶液，滴定开始，速度1滴/2秒，当锥形瓶内壁溶液颜色变浅时已接近滴定终点，应放慢滴定速度，滴定终点蓝色消失。记录消耗体积V标。
B.准确测定
加碱性酒石酸铜甲液、乙液各5.0 ml于锥形瓶中，由滴定管预加标准葡萄糖溶液（V标—1）ml，放置电炉上加热，使其在两分钟沸腾并维持30秒，然后在溶液沸腾状态下由滴定管继续滴加标准葡萄糖溶液，滴定开始，速度1滴/2秒，当锥形瓶内壁溶液颜色变浅时已接近滴定终点，应放慢滴定速度，滴定终点蓝色消失。记录消耗体积V1。
3．样品液测定
测定方法同“标定碱性酒石酸铜试剂”，由滴定管预加的标准葡萄糖溶液更换为样品溶液X ml，记录消耗体积V样。
测定方法同“标定碱性酒石酸铜试剂”，由滴定管预加样品溶液（V样—1）ml，记录消耗体积V。
4．测定结果的计算
F=CV1
式中： m------样品质量，g；
F-------10 ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg；
C-------标准葡萄糖溶液浓度,mg/ml；
V1-----标定碱性酒石酸铜溶液消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml；
V------测定样品时消耗溶液的体积，ml；
250------样品溶液的总体积，ml；
20%-----鲜土豆中干物质含量（鲜土豆中水分含量按80%计）。
0.9------还原糖换算成淀粉的系数。
1．为何滴定要在沸腾条件下进行？
2．影响测定结果的主要操作因素？
标定碱性酒石酸铜溶液消耗葡萄糖标准溶液的总体积V1=
测定样品时消耗溶液的体积V=
1．注意事项参见实验一。
2．此法所用的氧化剂碱性酒石酸铜的氧化能力较强，醛糖和酮糖都可被氧化，所以测得的是总还原糖量。
3．次甲基蓝也是一种氧化剂，但在测定条件下氧化能力比Cu2+弱，故还原糖先与Cu2+反应，Cu2+完全反应后，稍过量的还原糖才与次甲基蓝指示剂反应，使之由蓝色变为无色，指示到达终点。
4．碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。
实验三：测定面粉中蛋白质含量
1．通过本实验的学习，使学生掌握凯氏法测定蛋白质的实验原理。
2．通过本实验的学习，使学生掌握蛋白质测定操作技术及方法。
1．样品消化。
2．氨的蒸馏。
3．样品液测定。
1．0.1 mol/L盐酸标准溶液的制备及标定。
2．样品消化方法及操作。
样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后，再以标准盐酸或硫酸滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。
面粉样品消化以及氨的蒸馏等操作。
A．电子天平（1/10000）
B．消化炉20孔（HYP8.14.20）, KDNJ-2C型蒸馏装置
C．酸式滴定管25ml 1支，100 ml容量瓶1支，量筒25 ml 1支，移液管20 ml;锥型瓶250 ml
A．浓硫酸，硫酸钾，硫酸铜
B．2%硼酸溶液：20g硼酸溶于1000ml容量瓶中。
C．混合指示剂①（标定盐酸时放入基准碳酸钠溶液中）：3份0.2%溴甲酚绿乙醇溶液与2份0.1%甲基红乙醇溶液混合。
D．混合指示剂②（放入硼酸吸收溶液中）：1份0.2%甲基红乙醇溶液于5份0.2%溴甲酚绿乙醇溶液，临用时混合。
E．40%氢氧化钠溶液（M/V）
F．0.1 mol/L盐酸标准溶液：量取9 ml浓盐酸缓慢注入1000 ml水中，混匀。
标定：精密称取0.2g在270-300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠，加50 ml水使之溶解，加10滴混合指示剂①，用配置好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2分钟。冷却后继续滴定至溶液在呈暗红色。同时作空白试验。
式中: C--------盐酸标准溶液摩尔浓度，mol/L；
m--------基准无水碳酸钠的克数，g；
V1-------盐酸溶液的用量，ml；
V0-------空白试验盐酸溶液用量，ml;
53-------碳酸钠的摩尔质量，g/mol。
3. 测定样品
面粉
1．样品的消化
精密称取面粉0.4~0.6g（精确至0.0001g）移入消化管中，加入硫酸铜0.3 g，硫酸钾3 g及浓硫酸10 ml，摇匀后放入消化管中。在消化炉中进行消化。同时作空白试验。至溶液蓝绿色透明后继续加热30分钟。在通风处中自然冷却，转移入100 ml容量瓶中，定容。
2．氨的蒸馏
量取20.0 ml消化液放入消化管中，固定在蒸馏装置中。在吸收瓶中加入25 ml 2%硼酸溶液，混合指示剂②号2~3滴。将接收瓶放置于蒸馏装置中，打开加碱开关至溶液成深蓝色为止。打开蒸汽开关进行蒸馏（约6分钟即可完成）。在关闭蒸汽开关前，先将接受瓶放下少许，使冷凝管下端离开液面，用蒸馏水冲洗管口，蒸馏约1分钟，用pH试纸检验不呈碱性即为终点，关闭蒸汽开关。
3．样品液测定及结果计算
用标准的盐酸溶液滴定样品吸收液，溶液由蓝色变为微红色即为终点，记录盐酸用量。
C-------盐酸标准溶液的浓度，mol/L；
V1-----滴定样品吸收液消耗标准盐酸液体积，ml；
V0-----滴定样品空白吸收液消耗标准盐酸液体积，ml；
V2-----蒸馏用样品消化液体积, ml；
V------样品消化液定容体积, ml；
m-------样品质量，g；
M氮------氮的摩尔质量，14.01g/mol；
F-------换算为蛋白质的系数，蛋白质中氮的含量一般为15-17%按16%计算乘以6.25记为蛋白质。乳制品为为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24，花生为4.46，肉及肉制品为6.25。
1．在样品消化初期为何要在200℃左右保持一段时间？对于含脂肪和糖较多的样品如何操作使消化正常进行？
2．当样品消化至透明后为何还要继续30分钟？
3．硫酸铜、硫酸钾在消化过程中的作用？
滴定样品吸收液消耗标准盐酸液体积V1=
滴定样品空白吸收液消耗标准盐酸液体积V0=
2．KDN型定氮仪操作说明
A．消化装置
⑴ 消化前准备
a 将抽气泵的螺口同水嘴的内螺纹连接牢固，然后把毒气罩的胶管接在抽气泵的横出口处。抽气泵一端胶管上下水道（注：出水口胶管长度不得超出30cm,并不准湾曲）开足水嘴，是抽气泵有足够的吸力。
b 接通消化炉上电源插座，开通电源开关，按需要设定于指温度，按住仪表按键0.5秒后放开进入主控设定置状态， ▼设置减键， ▲设置加键，按设置键确定设置温度。
⑵．消化操作
a 将样品、硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸干警无损的转入清洗干净的消化管中，放在消化炉支架上，招上毒气罩，锁上两面拉钩。
b 消化结束，戴上手套，将消化架连同消化管一同移到消化管托架上，在通风处中冷却至室温。在冷却过程中，毒气罩必须保持吸气状态防止废弃溢出。
B．蒸馏装置
⑴ 蒸馏前准备
a 接通进水口、排水口，注意排水浇灌出口不得高于仪器底平面，同时关闭排水阀门。
b 接通电源，电源线内必须有良好接地，同时必须保持同仪器相同（主意接通电源时，必须关汽、碱开关）
c 进水胶管放入蒸馏水筒中，加碱胶管放入40%氢氧化钠溶液中。
⑵ 蒸馏操作
a 开自来水龙头，使自来水经过给水口进入冷凝管。注意水流量以保持冷凝管起到冷却作用为止。
b 待红色指示灯亮时，开汽开关至蒸汽导出管放出蒸汽，关汽开关。
c 在蒸馏导出管支架上，放上已经加入适量接收液的锥型瓶，向下压右侧手柄使蒸馏导出管的末端浸入接收液内。
d 将已经定容的消化液取10.0ml放入消化管中，向上体左侧手柄，将消化管套在防溅管密封圈上，稍加转动使其保持接口密封，关上防溅罩。
e 打开加碱开关，加入适量的氢氧化钠溶液至蒸馏液碱性颜色变深色为止，关闭碱开关。（主意：如仪器连续数天停止使用，必须吸空胶管和碱泵内的溶液，然后用10%的盐酸或硼酸溶液清洗胶管和碱泵，再用蒸馏水清洗1~2次。）
f 开汽开关，开始蒸馏，直至氨气全部蒸出，约6分钟。（在检查蒸馏终点时，应先将蒸馏瓶离开液面，用蒸馏水冲洗蒸馏管，至蒸馏液再流出时，用试纸检查不再呈碱性，即为终点）。蒸馏完毕，先取下接受瓶，关闭汽开关。
实验四：测定火腿中亚硝酸盐含量
1．通过本实验的学习，使学生掌握比色法测定亚硝酸盐的实验原理。
2．通过本实验的学习，使学生掌握分光光度计的操作技术及比色法测定方法。
2．比色法测定。
2．分光光度计的使用方法。
样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化后，在与盐酸萘乙二胺耦合成紫红色染料，在最大吸收波长538 nm出可测得吸光度，并与标准比较定量。
火腿样品的制备，分光光度计的操作。
B．高速组织捣碎机
C．分光光度计
D．比色管25 ml 8支
E．刻度移液管：1 ml 2支；2 ml 3支；5 ml 2支；10 ml 1支
F．移液管20 ml 1支
G．容量瓶250 ml 2支
H．漏斗60 ml
A．亚铁氰化钾溶液10.6%：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并定容至1000 ml。
B．乙酸锌溶液22%： 称取乙酸锌220g加30 ml冰乙酸溶于水中，并稀释至1000 ml。
C．饱和硼砂溶液5%：称取硼砂50g（四硼酸钠）溶于1000 ml热水中，冷却后定容。
D．对氨基苯磺酸溶液0.4%：称取4g对氨基苯磺酸溶于1000 ml 20%盐酸中，避光保存。
E．盐酸萘乙二胺0.2%：称取2g盐酸萘乙二胺溶于1000 ml水中，避光保存。
F．亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000g于硅胶干燥器干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移至500 ml容量瓶中，并稀释到刻度，此溶液每毫升相当于200μg亚硝酸钠。
G．亚硝酸钠标准使用液：临用时吸取亚硝酸钠标准溶液5.0 ml置于200 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5μg亚硝酸钠。
火腿
1．制备样品溶液
将火腿去皮，称重。火腿：水=1：1 用高速组织捣碎机捣碎成肉浆。
称取肉浆8.0 g加饱和硼砂溶液6.3 ml，用70℃蒸馏水约150 ml转移入250 ml容量瓶中，置沸水浴中15分钟。取出边转动边加入2.5 ml亚铁氰化钾溶液，再加入2.5 ml乙酸锌溶液，冷却，定容至250 ml。静止30分钟，过滤，弃初滤液约20ml得滤液供测定使用。
2．比色测定
测定条件：波长538nm 比色皿：2 cm
编号 0 1 2 3 4 5 6 7样1 8样2
亚硝酸钠5μg/ml 0ml 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.5 x x
对氨基苯磺酸0.4% 1ml 1 1 1 1 1 1 1 1
盐酸萘乙二胺0.2% 0.5ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
加水至刻度25 ml 静置15分钟
吸光度
式中： W------样品质量，g；
A------测定用样品溶液亚硝酸盐含量，μg；
X------用于比色测定的样品溶液用量，ml.。
1．亚铁氰化钾和乙酸锌的作用？
2．饱和硼砂溶液在样品制备中的作用？
样品质量W=
测定用样品溶液亚硝酸盐含量A=
实验五：测定罐头食品中锡含量
1．通过本实验的学习，使学生掌握苯芴酮法测定锡的原理。
2．通过本实验的学习，使学生掌握硫酸—硝酸湿法消化样品的操作方法。
1．样品制备及消化。
1．样品制备、消化及操作。
样品经消化，在弱酸性溶液中，四价锡离子与苯芴酮形成微溶性橙红色络合物，在保护性胶体存在下与标准系列进行比较。
罐头食品样品的制备及消化，分光光度计的操作。
A．高速组织捣碎机
B．分光光度计
C．恒温水浴
D．消化炉20孔（HYP8.14.20）
E．比色管25 ml 8支
F．吸量管1 ml 3支；5 ml 2支；2 ml 1支；10 ml 1支
A．浓硫酸，浓硝酸
B．酒石酸10%
C．动物胶0.5%
D．抗坏血酸1%
E．苯芴酮溶液0.01%：称取0.010g苯芴酮，加少量甲醇及1：9硫酸数滴溶解，用甲醇或乙醇稀释至100 ml。
F．锡标准溶液：精确称取0.1000g金属锡至于小烧杯中，加10 ml浓硫酸盖上表皿，加热至锡完全溶解，移去表皿，继续加热至发生浓白烟，冷却，慢慢加5 ml水移入100 ml容量瓶中，用1：9硫酸多次洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液锡含量为1.0 mg/mL。
锡标准使用液：移取10.0 ml锡标准溶液于100 ml容量瓶中，以1：9硫酸稀释至刻度，混匀，如此在稀释至每毫升相当于10μg锡。
罐头
1．样品处理
称取经捣碎均匀的罐头样品10.0～20.0 g（视锡含量而定）移入200 ml消化管中。加浓硫酸10 ml，在通风橱中加浓硝酸20 ml，加2粒素烧瓷片。
在通风橱内的消化炉中进行消化，先在200℃左右维持15分钟，此时消化管内产生棕色浓烟。待剧烈反应停止后，提高温度至450℃，当被消化物开始变棕色，立即补加数滴硝酸，应注意防止溅到手上。继续加热消化，至溶液无色透明或微带黄色时，消化管内产生浓白烟，将消化管移出消化炉，放于冷却架上，在通风橱中自然冷却至室温。
加入20 ml蒸馏水或草酸铵溶液，再加热产生浓白烟，并保持20分钟，以除去残余的硝酸。
将消化管移出消化炉，置于冷却架上，在通风橱中自然冷却至室温，将消化管中的消化液转移入100 ml容量瓶中，用水洗涤消化管并入容量瓶中，冷却。加水定容至100 ml，混匀备用。
测定条件：水浴37℃，30分钟；波长490nm，比色皿1cm
编号 0 1 2 3 4 5 6 7
锡标准液10μg/ml 0ml 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 X1 X2
酒石酸10% 0.5ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
酚酞 1% 1滴
氨水 1：1 中和至粉红色
硫酸 1：9 3ml 3 3 3 3 3 3 3
动物胶0.5% 1ml 1 1 1 1 1 1 1
抗坏血酸1% 2.5ml 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
加水至25ml，再加入0.01%苯芴酮 2ml
式中：X-----样品锡含量，mg/kg或mg/L；
A1-----测定用样品消化液中锡的含量，μg;
A2-----试剂空白液中锡的含量， ；
m-----样品质量，g ；或体积，ml;
V1-----样品消化液的总体积，ml;
V2-----测定用样品消化液的体积，ml.
1．配制锡标准溶液时如何保证溶液中的锡离子为Sn4？
2．样品消化时如何保证消化完全彻底？
3．在比色测定时为何调整pH？
测定用样品消化液中锡的含量A1=
试剂空白液中锡的含量A2=
实验六：测定奶粉中脂肪的含量
1．通过本实验的学习，使学生掌握索氏提取法的原理与操作。
2．通过本实验的学习，使学生掌握奶粉中脂肪含量测定的操作方法。
1．样品处理。
2．索氏抽提。
2．索氏提取器的使用方法。
样品用无水乙醚或石油萃取后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等脂溶性物质。索氏抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。
奶粉样品的处理，索氏提取器的操作。
A．索氏提取器
B．恒温水浴箱
C．干燥器
D．分析天平
A．无水乙醚或石油醚
B．海砂
奶粉
1．样品处理：
精密称取经恒重处理后的脂肪收集瓶，m瓶（准至0.0001 g）。
固体样品：精密称取2~5 g样品m样（可取测定水分后的样品），必要时拌以海砂，全部移入滤纸筒内。
液体或半固体样品：精密称取5~10 g，至于蒸发皿中，加入海砂约20 g（准至±0.0001 g）于沸水浴上蒸干后，再于95~105℃干燥，研细，全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒，均用沾有乙醚的脱脂棉擦净，并将棉花放入滤纸筒内。
2．脂肪抽提与称重：
将滤纸筒放入索氏提取器内，连接已干燥至恒重的脂肪收集瓶，从冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴上（夏天65℃，冬天80℃左右）加热，使乙醚或石油醚不断回流提取1~1.5 h，一般在条件允许的情况下视含有量高低提取6~12 h，至抽提完全为止。取下脂肪收集瓶，回收乙醚或石油醚，待收集瓶内溶剂剩1~2 mL时，转置水浴上蒸干，再于95~105℃干燥20 min，放干燥器内冷却20 min后称量m总。
3．测定结果的计算：
m总-m瓶
X = ——————×100％
m样
式中：X —样品中脂肪的含量，%
m瓶—脂肪收集瓶的质量，g
m样—样品的质量（如果是测定水分后的样品，应按测定水分前的湿润样品质量计），g
m总—收集瓶和脂肪的总质量，g
1．索氏法测脂肪的注意事项有哪些？
2．如果样品是湿润的应如何处理？为什么？
3．综述比较脂肪的测定方法。
脂肪收集瓶的质量m瓶=
样品的质量m样=
收集瓶和脂肪的总质量m总=
